《蔬菜水果中多菌灵的快速检测胶体金免疫层析法》方法解读

  多菌灵（carbendazim）又名棉萎灵、苯并咪唑44号，是一种广谱性杀菌剂，对多种作物由真菌（如半知菌、多子囊菌）引起的病害有防治效果，可用于叶面喷雾、种子处理和土壤处理等。多菌灵是农业生产中使用范围最广、用量最多的杀菌剂之一，占我国杀菌剂总量的25%。由于多菌灵会降低雄性生育力、胚胎毒性、内分泌紊乱、致畸等，因此被世界卫生组织（WHO）列为危险化学品，美国环保署（EPA）列为人类致癌物，欧盟（EU）列为内分泌干扰物，但中国、巴西、印度等国家仍在大规模使用。

  目前国家食品安全标准GB 2763-2021对多菌灵的限量标准有69项，涉及农产品60项，其中蔬菜水果47项，制定多菌灵在蔬菜中的最大残留限量为0.02~5.0mg/kg，在水果中的最大残留限量为0.5~5.0mg/kg。我国对多菌灵检验测试标准多是基于液相色谱、液质联用等仪器方法如GB/T 5009.188、GB/T 23380、GB/T 20769等。由于蔬菜水果等生鲜流通快、保质期短，因此就需要快速检测的方法。目前国内市场已商品化的多菌灵残留快速检测试剂盒多以胶体金免疫层析方法为主，但相关检测的新方法的标准缺失。因此中国检验检疫科学研究院牵头制定了食品快速检测的新方法标准KJ202205《蔬菜水果中多菌灵的快速检测 胶体金免疫层析法》。

  此检测方法基于竞争抑制的胶体金免疫层析技术，适用于胡萝卜、菜用大豆、莲藕、抱子甘蓝、叶芥菜、韭菜、番茄、结球莴苣、草莓、桃、西瓜、梨、橙等蔬菜水果（不适用于豌豆、腌制小黄瓜）中多菌灵残留的快速定性测定。根据《中华人民共和国食品安全法》第一百一十二条“县级以上人民政府食品安全监督管理部门在食品安全监督管理工作中能够使用国家规定的快速检测的新方法对食品进行抽查检测”。因此在实际监督管理中，可先使用本办法来进行初筛，对于检测出多菌灵残留阳性蔬菜水果样品，再进一步使用推荐的参比办法来进行验证。快检方法初筛结合仪器方法确证可提高效率节约成本。

  胶体金免疫层析法因灵敏度较高、检测时间短，且不需要昂贵仪器设施，被认为是目前最具有应用价值和发展的潜在能力的快速检测分析技术之一。目前，多菌灵快检试纸条产品已进入市场，助力食品安全监管。但是国内快检市场还不够规范，部分企业产品质量水平不稳定，可靠性不高，各项性能参数不能够满足监督管理要求。基于胶体金的快检方法，仅见团体标准T/ZNZ 017-2020、T/CATCM 010-2019，仅分别针对草莓、杨梅以及中药材和饮片。国内未有针对农产品水果、蔬菜的快速检验测试标准。因此，本方法以国标GB 2763-2021中多菌灵最大残留限量标准为基本准则，建立蔬菜、水果中多菌灵的胶体金免疫层析快速定性检测的新方法标准。

  1.由于GB 2763-2021中不同基质多菌灵最大残留限量不同，因此不同基质的稀释比例不同，检测中应根据基质类型选择相应的稀释比例；

  2.测试前，需将未开封的检测卡或试纸条放置恢复至室温，温度过低有可能影响检测结果；

  3.对于金标微孔产品，试样待测液加入于金标微孔中，用移液器上下抽吸5～10次至微孔试剂混合均匀，注意手法最好能够降低气泡；

  4.反应时间需精确控制，到达产品说明书的检测时间后立即进行结果判读，时间不准确有一定的概率会影响结果判读；

  5.采用目视法，通过对比控制线（C线）和检测线（T线）的颜色深浅进行结果判定。请按照产品说明书要求对结果进行判定，注意无效结果的情况，也可使用胶体金读数仪判读。