发布日期： 2024-03-10 04:15:12 来源：火狐体育全站官网app
EDTA的胰酶消化细胞，胰酶消化时刻不宜过长或过短，最好是在悄悄吹打可以使贴壁细胞吹打下来时，参加细胞培育液，将细胞悄悄吹打下来，转移到离心管内，500-1000g离心5min搜集细胞。
3) 搜集细胞后，参加预冷PBS溶液轻摇或用移液器轻柔吹打洗刷，离心搜集细胞，共洗刷两次。
染色孵育后，每管参加400μl 1×Binding Buffer工作液，混匀后运用流式细胞仪检测（1小时内检测）。
主张设置经凋亡诱导的正常细胞、PI单染和Annexin V-FITC单染3个对照组，正常细胞组可作为荧光补偿调理去除光谱堆叠和设定十字门的方位。成果可用CellQuest等软件做多元化的剖析，制作双色散点图（two-color dot plot），FITC为横坐标，PI为纵坐标。Annexin V-FITC和PI联合运用时，活细胞仅有很低强度的布景荧光，前期凋亡细胞仅有较强的绿色荧光，晚期凋亡细胞有绿色和赤色两层荧光。
染色孵育后涂片，显微镜下调查。运用荧光显微镜上的蓝光和绿光通道别离调查FITC和PI。被Annexin V-FITC结合的细胞显现浆膜上有绿色光环。损失细胞膜完整性的细胞，细胞核显现赤色，膜上有绿色光环。
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