发布日期： 2024-03-04 20:42:57 来源：ELISA试剂盒
试剂盒操作过程 操作过程实验开端前各试剂均应平衡至室温(试剂不能直接在 37℃溶解)试剂或样品稀释时均需混匀混匀时尽可能的防止起泡。实验前应猜测样品含量如样品浓度过高时应对样品进行稀释以使稀释后的样品契合试剂盒的查验测验规模核算时再乘以相应的稀释倍数。1.加样别离设空白孔、规范孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液 100μ l余孔别离加规范品或待测样品 100μ l留意别有气泡加样将样品加于酶标板孔底部尽量不触及孔壁悄悄晃动混匀酶标板加上盖或覆膜37℃反响 120 分钟。为确保实验成果有效性每次实验请运用...
试剂盒操作过程 操作过程实验开端前各试剂均应平衡至室温(试剂不能直接在 37℃溶解)试剂或样品稀释时均需混匀混匀时尽可能的防止起泡。实验前应猜测样品含量如样品浓度过高时应对样品进行稀释以使稀释后的样品契合试剂盒的查验测验规模核算时再乘以相应的稀释倍数。1.加样别离设空白孔、规范孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液 100 l余孔别离加规范品或待测样品 100 l留意别有气泡加样将样品加于酶标板孔底部尽量不触及孔壁悄悄晃动混匀酶标板加上盖或覆膜37℃反响 120 分钟。为确保实验成果有效性每次实验请运用新的规范品溶液。2.弃去液体甩干不必洗刷。每孔加检测溶液 A 工作液 100 l(在运用前一小时内制造)酶标板加上覆膜,37℃反响 60 分钟。3.温育 60 分钟后弃去孔内液体甩干洗板 3 次每次浸泡 1-2 分钟大约 400 l/每孔甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。4.每孔加检测溶液 B 工作液(同检测 A 工作液)100 l酶标板加上覆膜 37℃反响 60 分钟。5.温育 60分钟后弃去孔内液体甩干洗板 5 次每次浸泡 1-2 分钟350 l/每孔甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。6.依序每孔加底物溶液 90 l酶标板加上覆膜 37℃避光显色(30 分钟内此刻肉眼可见规范品的前 3-4 孔有显着的梯度兰色后 3-4 孔梯度不显着即可停止)。7.依序每孔加停止溶液 50 l停止反响白介素 ELISA 试剂盒此刻蓝色立转黄色。停止液的参加次序应尽量与底物液的参加次序相同。为了可以更好的确保实验成果的准确性底物反响时刻到后应赶快参加停止液。8.用酶联仪在 450nm 波长依序丈量各孔的光密度(OD 值)。在加停止液后当即进行细心的检测。注1.试剂预备一切试剂都必须在运用前到达室温运用后请当即依照说明书要求保存试剂。实验操作中请运用一次性的吸头防止穿插污染。2.加样加样或加试剂时请留意在汲取标本/规范品酶结合物或底物时第一个孔与最终一个孔加样之间的时刻距离假如太大将会导致不同的预孵育时刻然后显着地影响到丈量值的准确性及重复性。一次加样时刻(包含规范品及一切样品)最好控制在 10 分钟内如标本数量多引荐运用多道移液器加样。3.孵育为防止样品蒸腾实验时将反响板放于铺有湿布的密闭盒内酶标板加上盖或覆膜以防止液体蒸腾洗板后应赶快进行下步操作任何时侯都应防止酶标板处于枯燥状况一起应严格遵守给定的孵育时刻和温度。4.洗刷洗刷过程中反响孔中残留的洗刷液应在滤纸上充沛拍干勿将滤
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