发布日期： 2023-11-26 05:46:30 来源：火狐体育全站官网app
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小鼠单核细胞趋化蛋白4elisa检测试剂盒品牌实验仪器：酶标仪、洗板机、离心机、培养箱等
标本齐全：血清、血浆、细胞上清液、尿液、体液、灌洗液、脑脊髓、心房水、胸房水等等。
1. 血清：全血标本请于室温放置2小时或4℃过夜后于1000 x g离心20分钟，取上清即可检测，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
2. 血浆：可用EDTA或肝素作为抗凝剂，标本采集后30分钟内于2 - 8 C 1000 x g离心15分钟，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
3. 其它生物标本：请1000 x g离心20分钟，取上清即可检测，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
ELISA方法被大范围的应用于各种抗原和抗体测定。但ELISA测定中影响因素较多，而且其操作中有一定的技术方面的要求，在检验测试过程中除正常反应外，有时常见到一些错误的结果。引起ELISA测定错误结果的问题大多有：①标本因素；②试剂因素；③操作因素。下面就一些常见ELISA操作的流程中的问题一一分析。
1．样品稀释 酶联免疫反应是一种敏感性很高的反应，如果血清不稀释，不可避免会产生很强的非特异性反应，出现假阳性。因此，国外检测血清抗体的试剂盒，均规定将血清稀释至适当的倍数，以降低非特异性反应，使特异性的抗原抗体反应充足表现出来。一般产品的样品稀释倍数均通过大量试验确定，以保证试验的灵敏度和特异性。但是，有些用户未能严格按使用说明书操作，如某些产品应取10l样品进行稀释，个别用户取5l甚至1l样品进行稀释，由于吸嘴上不可避免地沾有样品以及微量移液器的精度不够，因此造成样品稀释倍数不准确，检测结果出现问题。
2．试剂盒平衡 试剂盒中所有试剂和板条均应在试验前平衡至室温（约25℃），一般需在室温放置20～30分钟以上。平衡时间太短会造成试剂混匀不够，样品孵育时间相对缩短，ELISA反应不够充分。冬季室温低，可将试剂盒置37℃温箱20分钟。
3．样品和试剂的混匀 稀释前、后的样品必须充分混匀，所有试剂在加样前也须摇匀，以保证试验的均一性。
N-(2-乙酰氨基)-亚氨基二乙酸二钠盐30次/100ul/支进口/国产
（1）待测样品孔中每孔加入待测样品100l，每种样品设3个平行孔；设两个阴性对照孔，每孔加未处理组的细胞裂解液100l；另设一个空白对照孔，加入纯细胞裂解液100l。
（3）洗板：吸干孔内反应液，用洗涤液过洗一遍（将洗涤液注满板孔后，即甩去），之后将洗涤液注满板孔，浸泡1-2分钟，间歇摇动。甩去孔内液体后在吸水纸上拍干。重复洗涤3-4次。
（4）阴性对照孔每孔加入PBS 50l，样品孔及空白孔每孔加入1:500稀释的兔抗人AIF抗体工作液50l。
（7）每孔加1:5000稀释的HRP-标记的山羊抗兔抗体工作液 100l。
（12）分别测450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，终测得的OD值为两者之差（W1-W2），以减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。
（13）数据处理：在得出标本（S）和阴性对照（N）的 OD值后，计算S/N值。S/N2.1为阳性判定标准。
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